1 简介
质量分析器是质谱仪器的核心,由质量分析器的不同构成了不同种类的质谱仪器。是将离子源产生的离子按m/z顺序分开并排列成谱的仪器。由于不同类型的质谱仪器有不同的原理、功能、指标、应用范围,还涉及到它们可能有不同的实验方法,因而有必要了解各种质谱分析器
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有机质谱分析仪
2 主要类型
主要分为
(1)单聚焦质量分析器
(2) 双聚焦质量分析器
(3)四极杆质量分析器
(4)离子阱质量分析器
(5)傅立叶变换离子回旋共振(FT-ICR)
(6)飞行时间质量分析器(TOF)
3 单聚焦质量分析器
单聚焦质量分析器
单聚焦质量分析器
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其主要部件为一个一定半径的圆形管道,在其垂直方向上装有扇形磁铁,产生均匀、稳定磁场,从离子源射入的离子束在磁场作用下,由直线运动变成弧形运动。不同m/z的离子,运动曲线半径R不同,被质量分析器分开。由于出射狭缝和离子检测器的位置固定,即离子弧形运动的曲线半径R是固定的,故一般采用连续改变加速电压或磁场强度,使不同m/z的离子依次通过出射狭缝,以半径为R的弧形运动方式到达离子检测器,使离子从时间上被分开。由式若固定加速电压U,连续改变磁场强度B,称为磁场扫描,则;若固定磁场强度B,连续改变加速电压U,称为电场扫描,则。无论磁场扫描或电场扫描,凡m/z相同的离子均能汇聚成为离子束,即方向聚焦。由于提高加速电压U仪器的分辨率得到提高,因而宜采用尽可能高的加速电压。当取U为定值时,通过磁场扫描,顺次记录下离子的m/z和相对强度,得到质谱图,单聚焦质量分析器结构简单,操作方便,但分辨率低。
4 双聚焦质量分析器
双聚焦质量分析器
在单聚焦质量分析器中,离子源产生的离子由于在被加速初始能量不同,即速度不同,即使质荷比相同的离子,最后不能全部聚焦在检测器上,致使仪器分辨率不高
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。为了提高分辨率,通常采用双聚焦质量分析器,即在磁分析器之前加一个扇形电场。离子垂直进入扇形电场,受到与速度垂直方向的作用,改作圆周运动,当离子所受到的电场力与离子运动的离心力相平衡时,离子运动发生偏转的半径R与其质荷比m/z、运动速度v和静电场的电场强度E。当电场强度一定时,R取决于离子的速度或质荷比。因此,扇形电场是将质量相同而速度不同的离子分离聚焦,使得速度不合适的离子无法进入到进入磁场的狭缝中,即具有速度分离聚焦的作用。然后,经过狭缝进入磁分析器,再进行m/z方向聚焦。调节磁场强度(扫场),可使不同的离子束按质荷比顺序通过出口狭缝进入检测器。这种同时实现速度和方向双聚焦的分析器,称为双聚焦分析器。5 四级杆滤质器
四级杆滤质器
四极滤质器是
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由四根平行的圆柱形金属极杆组成,相对的极杆被对角地连接起来,构成两组电极。在两电极间加有数值相等方向相反的直流电压Ude和射频交流电压Urf。四根极杆内所包围的空间便产生双曲线形电场。从离子源入射的加速离子穿过四极杆双曲型电场中,会受到电场作用,只有选定的m/z离子以限定的频率稳定地通过四极滤质器,其它离子则碰到极杆上被吸滤掉,不能通过四极杆滤质器,即达到"滤质"的作用。碎片离子的共振频率与四支电极的频率相同时,才可通过电极孔隙到达检测器,改变扫描频率可使不同质荷比的离子通过。实际上在一定条件下,被检测离子(m/z)与电压呈线性关系。因此,改变直流和射频交流电压可达到质量扫描的目的,这就是四极滤质器的工作原理。由于四极滤质器结构紧凑,体积小,扫描速度快,适用于色谱-质谱联用仪器。优点:
四级杆质量分析器是一种无磁分析器,体积小,重量轻,操作方便,扫描速度快,分辨率较高,适用于色谱—质谱联用仪器。
应用:
四极杆质谱计是目前最成熟、应用最广泛的小型质谱计之一。在气相色谱-质谱( GC/MS)和液相色谱-质谱(LC/MS) 联用仪中,四极杆是最常用的质量分析器之一。在研究级应用中,常涉及质谱仪器多级串联系统MSn,而四极杆质谱计则是MSn 实验中最常用的质谱计类型之一;例如:三级四极杆串联质谱。
6 离子阱
离子阱
由两个端盖电极和位于它们之间的类似四极杆的环电极构成。端盖电极施加直流电压或接地,环电极施加射频电压(rf),通过施加适当电压就可以形成一个离子阱
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。根据rf电压的大小,离子阱就可捕捉某一质量范围的离子。离子阱可以储存离子,待离子累积到一定数目后,升高环电极上的rf电压,离子按质量从高到低的次序依次离开离子阱,被电子倍增监测器检测。目前离子阱分析器已发展到可以分析质荷比高达数千的离子。离子阱在全扫描模式下仍然具有较高灵敏度,而且单个离子阱通过期间序列的设定就可以实现多级质谱的功能。优点及用途
1、单一的离子阱可实现多级串联质谱MSn;
2、结构简单,性价比高;
3、灵敏度高,较四极质量分析器高10~1 000 倍;
4、质量范围大(商品仪器已达6 000)。
这些优点使得离子阱质谱计在物理学、分析化学、医学、环境科学、生命科学等领域中获得了广泛的应用。
7 飞行时间质量分析器
飞行时间质量分析器
原理:用一个脉冲将离子源中的离子瞬间引出,经加速电压加速,它们具有相同的动能而进入漂移管,质荷比最小的离子具有最快的速度因而首先到达检测器,质荷比最大的离子则最后到达检测器
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。飞行时间质量分析器既不用电场也不用磁场,其核心是一个离子漂移管。离子源中的离子流被引入漂移管,离子在加速电压V的作用下得到动能。然后离子进入长度为L的自由空间,即漂移区,假定离子在漂移区移动的时间为T。。可以看出,离子在漂移管中飞行的时间与离子质荷比的平方根成正比,对于能量相同的离子,质荷比越大,达到检测器所需的时间越长,根据这一原则,可以把不同质荷比的离子因其飞行速度不同而分离,依次按顺序到达检测器。漂移管的长度L越长,分辨率越高。飞行时间分析用具有大的质量分析范围和较高的质量分辨率,尤其适合蛋白等生物大分子分析。
优点:
a)从原理可知,飞行时间质谱计检测离子的质荷比是没有上限的,这就特别适合于生物大分子的测定。如:用TOF测定单克隆的人免疫球蛋白,分子量已高达982000 2000u。 b)飞行时间质谱计要求离子尽可能“同时”开始飞行,适合于与脉冲产生离子的电离过程相搭配,分析适用于脉冲离子化方式(如MALDI)的大分子量的多肽、蛋白质。 c)扫描速度快,适于研究极快的过程。 d)结构简单,便于维护。
8 傅立叶变换离子回旋共振
傅立叶变换离子回旋共振
原理FT-ICR MS 将离子源产生的离子束引入ICR中,随后施加一个涵盖了所有离子回旋频率的宽频域射频信号。在此信号的激发下, 所有离子同时发生共振并沿着一个半径逐渐增大的螺旋型轨迹运动
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当运动半径增大到一定程度之后停止激发,所有离子都同时从共振状态回落,并且在检测板上形成一个自由感应衰减信号,即像电流(image current),被电学仪器放大和记录。得到的像电流是包括了所有离子自由感应衰减信息的时域信号,在经过傅立叶转换以后就可以获得一个完整的频率域谱。而离子的质荷比与其共振频率具有一一对应关系,因此我们可以方便地得到通常的以质荷比为横坐标的质谱图。
特点
①傅立叶变换质谱计的分辨率极高,远远超过其它质谱计。在m=1000u时,商品仪器的分辨率可超过 ; ②可完成多级(时间上)串联质谱的操作,由于它可提供高分辨的数据,因而信息量更丰富; ③一般采用外电离源,可采用各种电离方式,便于与色谱仪联机; ④灵敏度高、质量范围宽、速度快、性能可靠等。 (FT-ICR)