酶标仪编辑

日期:2020-01-09     浏览:278    
0酶标仪简介
酶标仪即酶联免疫检测仪。是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动两大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。 测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
中文名
酶标仪
外文名
enzyme-labeled instrument
简    介
一台变相光电比色计或分光光度计
规    格
96孔板
用    途
应用于低紫外区的DNA、RNA定量
公    式
E=OD=a×b×c
1酶标仪简介
2酶标仪选购指南
酶标仪(MicroplateReader)是对酶联免疫检测(EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的,反应结果以颜色显示,通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用,使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛,同时促进了生殖健康技术水平提高。
国内许多计生站系统开展了酶免检测项目,如:乙肝五项、艾滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法,报出的结果缺乏科学的依据。例如:某弓形虫检测试剂盒中,临界值规定为:阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行,但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。
国内多家权威机构,如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性,并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读,酶免试剂的质控也应使用酶标仪,并提供酶标仪测定的原始数据,而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变(如:肝炎、艾滋病、优生优育等),判读更要求严谨,由误诊引起的纠纷很难处理。另外,住院手术病人术前的丙肝、艾滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段,正逐渐被许多单位所采用。
3酶标仪自检校准
1.外观
酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。
2.酶标仪的稳定性(漂移)
选用492nm波长,在吸光度0.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测定值之差不应超过±0.005A。
3.吸光度测定的准确度
选用405,492和620 nm波长,以空气为参比,分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用专用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测定3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。
4.吸光度测定的重复性
波长选择同(3),在酶标板第一排加注空白溶液,第二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式计算重复性:
5.酶标仪的线性
选用540nm波长,将标称值0.5,1.0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中,以空气为参比,各重复测定3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中,重复测定3次。
6.测定速度的检定
选用492nm波长,放入96孔酶标板进行测定,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。
酶标仪除了在选购时,应尽可能自检外,在使用中也应定期检定,以保证酶标仪测定的有效性  。
4酶标仪规格性能
1.光学系统
光栅光路系统,包括内建的参比检测通道,确保任何测量情况下获得一致的结果。
2.光路
长寿命闪烁氙灯光源,光栅单色光发生器,200 ~1000 nm波长范围内全波长扫描,1nm步进
3.检测模式
在微孔板检测模式和比色杯检测模式下均可进行全波长范围光谱扫描,对样品和空白同时扫描。
4.光谱扫描速度
10s,200~1000nm,1nm步进
5.样品前处理
无需衍生处理,即可直接测定DNA、RNA和蛋白的吸光值。
6.光程校准
使用微孔板检测时可直接读出OD值和浓度,对于水相溶液可使用光程校正
7.样品容器
可使用96&384孔板,或标准杯/微量杯
8.带宽
带宽2.4nm
9.读数范围
0 ~ 4 OD
10.线性范围
@450nm:0 ~ 2.5 Abs,±2%
11.检测准确度
@450nm:1%+0.003 Abs(0~2.0Abs),2%(2.0~2.5Abs)
12.检测精度
@450nm <1.0% CV
13.检测速度
8s/96孔;13s/384孔
14.温控范围
微孔板和比色杯模式均具温控功能,温控范围(室温+4)~ 65℃
15.振荡模式
轨道,双轨道和线性三种调速振荡模式,动力学过程中可执行背景振荡模式
16.数据处理及分析
通过PC端数据分析软件Gen5进行操作和设置:曲线拟合、定量分析、定性分析、动力学计算、自定义方程以、平行线分析(PLA,符合欧盟法规要求)及效价分析等。数据可一键导出到Excel,也可生成详尽的结果报告。
17.电源
电源输入 100 - 240 V (50/60 Hz),最大功率消耗 90W
18.体积
外部尺寸(H x W x D) 216 x 216 x 406mm
19.重量
11kg
20.配置
全波长读数仪一套(含比色杯基座)(比色皿必须为立式),标准96孔酶标板一包,电源线壹根,说明书一份,软件光盘一张。
5酶标仪参考资料

1.  曾俊, 张丹桂, 王革非,等. 酶标仪参数及性能检测[J]. 汕头大学医学院学报, 2008, 21(3):176-177.
 
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