1 气相色谱仪的基本部件
⑴载气 常用的载气主要有氮、氩、氢和二氧化碳等。这些气体一般都由高压气瓶供给
⑵进样器 气相色谱仪可以用于分离固相、气相和液相标本。液相标本采用微升注射器穿过橡皮隔片注入,气相标本采用特种气相注射器注入。
⑶谱柱及加热炉 色谱柱一般由金属或玻璃制成,通常采用的柱长2m~4m,内径2mm,毛细管柱长度可达20m~150m,内径为0.2mm。
载体一般采用惰性、多孔的固体颗粒。多由硅藻土或玻璃珠制成,分析不同极性的微生物化合物,为了获得最适的分离条件,要求有不同固定相的载体。比较常用的载体有:聚乙二醇(CarbOwax 20M)、F F A P(聚乙二醇20M 和2-硝基对苯二甲酸的反应产物),OV-17(苯基甲基硅酮)。OV-210、SE-30(甲基硅酮)、Chromosorb G(白色硅藻土载体)等。柱加热炉在温度控制上是非常重要。
⑷纪录仪
⑸数据处理装置 一般均附有数据处理计算机。
2 试验条件的选择
3 填充柱的制备
⑴称取一定量的载体于蒸发皿中,加2倍于载体体积的低沸点溶剂(氯仿丙酮、三氯甲烷等),使之溶解。
⑵取适量的固定液,倒入蒸发皿中,拌匀。注意应使载体全部覆盖在液面下,于红外灯下缓缓加热,不时轻轻搅拌,待溶液全部挥发。
⑶先将柱的一端用玻璃毛轻轻堵上,接上吸滤真空泵,柱的另一端接上漏斗,将填充剂从漏斗加入,同时启动真空泵,不时轻敲柱子各部,以使填充均匀。装满后,关闭真空泵,取下色谱柱,将加样的一端也填上一小团玻璃毛。
⑷将柱装入色谱柱中,在通载气前,先将炉温升至略高于操作温度,保持约1h,以使固定液受热熔化或粘度减小,在载体表面流布均匀,然后再通入载气,使色谱柱在操作温度下通载气数小时。
4 操作方法
⑴参考仪器使用说明书,将有关设备安装好,检查各系统各接头是否漏气,确定无误后,可开始操作。
⑵开气流总阀门,调节表头上的减压阀,使气体压力为22kg/cm2左右,调节稳压器针形阀,使载
气流速控制在所需要的流速值。
⑶设定柱温 (根据仪器恒温箱的性能控制温度波动值在一定的范围之内,如±0.5℃)。一般所用的柱温是在被分析物质的平均沸点左右或更低一些。若被分析物的沸程太宽,则可用程序升温法来升高柱温。
⑷加热进样器(气化室),使温度高于样品沸点的最高组分的沸点。
⑸加热检测器恒温箱,使温度与柱温一样或高于一定的值。
⑹气流和温度均达稳定后,给检测器通电流。若采用氢火焰离子化检测器则启动微电流放大器部分。
⑺检样器为零点,待稳定后,即可开始进样。
5 结果分析
气相色谱层析(Gas Chromatography GC)是一种分离分析的方法,它的特点是适合于多组分混合物的定性和定量分析。